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當前位置:首頁技術文章BGTurbo®無甘油,重組β-葡萄糖醛酸酶

BGTurbo®無甘油,重組β-葡萄糖醛酸酶

更新時間:2019-09-19點擊次數:2174

 

kurabiotec BGTurbo說明書

BGTurbo®無甘油,重組β-葡萄糖醛酸酶

Glycerol Free, High Efficiency Recombinant β-Glucuronidase

在自然界中已鑒定出超過8,000種不同的β-葡糖醛酸糖苷酶。只有一種能夠在短短10分鐘內催化所有葡萄糖醛酸苷的*水解,那就是BGTurbo®

我們精心研制BGTurbo ®使用大量的蛋白質模型和濕實驗室篩查,以創建一個大規模優化的β葡萄糖醛酸酶,不僅提供存在任何已知的酶的快的水解,而且還通過消除不必要的轉換和減少保存標本和峰值完整性背景噪音。

重組,率BGTurbo ®大化LCMS生產能力和報酬率的投資,兼容將全線自動化,并且既非常純凈,幾乎*一致。

我們需要為您提供適合的水解,以便您可以依靠您的答案為人們做多的事情。這就是BGTurbo ®為您提供。

 

產品規格

  • 產品形式:  液體,pH 7.0
  • 溫度范圍: 20-55°C
  • 宜溫度: 50°C
  • pH范圍: 6.5-7.2
  • 宜pH值: 6.8
  • 比活度: ≥200,000U/ mg蛋白質
  • 蛋白質: 1.0±0.05mg / ml
  • 純度: > 90%β-葡萄糖醛酸酶
  • 分子量: ~280KDa
  • 儲存/穩定性: 4°C至少10個月。
  • 活性單位定義:在pH 6.8和37℃(測定30分鐘)下,一個單位每小時從酚酞葡糖苷酸中釋放1.0μg酚酞。

產品概述:

BGTurbo®重組β-葡萄糖醛酸酶,為廣泛的共軛分析物提供高的水解活性,包括“難以裂解”的葡萄糖醛酸苷,特別是阿片類和阿片類藥物如可待ying。這種超純水性酶制劑可用于要求苛刻的高通量,臨床或法醫尿液藥物檢測實驗室。使用BGTurbo®進行快速水解和樣品制備,可以消除樣品制備瓶頸,同時實現全自動水解和當天報告的準確和可重復的分析結果。

工作溫度范圍:20 - 55°C蛋白:1.0±0.05mg / ml
工作pH范圍:6.5 - 7.2純度:> 90%β-葡萄糖醛酸酶
具體活動(PPG):> 200,000U / mg蛋白質存儲:在-20°C,至少保證10個月。

表1:BGTurbo孵育條件

 

阿片類藥物和阿片類藥物,ULOQ高達15,000ng / mLB Opiate /阿片類藥物,ULOQ高達2,500ng / mL和廣譜面板C其他:苯二氮卓類,(合成)大麻素,三環類抗抑郁藥......
BGT:尿液(v / v)1:12:51:5
時間(min)10分鐘10分鐘瞬間
溫度(°C)55℃下55℃下室內溫度
預計恢復> 85%的> 90%的> 95%

 

逐步協議:

  1. 可選的尿液標本離心。
  2. 根據表2移取尿量。
  3. 根據表2,在50%甲醇(MeOH)+去離子水中加入Buffer +BGTurbo®酶+內標(ISD)。
  4. 在的溫度和時間進行水解孵育。
  5. a)對于D&S方法,添加曲線 - 稀釋劑并立即注射(無離心)或b)進行F&S,SPE或SLE提取。

表2:水解混合物組合物(LCMS / MS的實施例)請參考下面的圖例。

 abC
 樣品制備(a)D&S(μL)F&S / SPE / SLE(μL)D&S(μL)F&S / SPE / SLE(μL)D&S(μLF&S / SPE / SLE(μL)
 尿501005010050100

MASTERMIX(d)

緩沖區(B)204020402040
BGTurbo5010020401020
DI-水15三十459055110
ISDs含50%MeOH(c)15三十15三十15三十
 150300150300150300
 孵化時間10分鐘10分鐘0分鐘
 TemperatureTime55℃下55℃下室內溫度

 

  • 樣品制備方法:D&S稀釋和射出/ F&S過濾和射出/ SPE固相萃取/ SLE:支持液體萃取
  • 緩沖液:  磷酸鈉500mM。pH 6.8或Kura Biotec提供緩沖液。
  • 50%甲醇中的內標物:總水解混合物中4%至6%MeOH是宜的并且使BGTurbo活化達1.6倍。
  • 可以制備含有50%MeOH中的緩沖液,酶,去離子水和ISD的Mastermix以簡化工作流程。儲存在2-8°C。5天內使用。

 

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