zymoresearch D4004說明書

DNA Clean & Concentrator-5

亮點

清潔并濃縮高達5微克的DNA≥ 用0µl洗滌殘渣在2分鐘內(nèi)洗脫6µl。

柱設(shè)計允許DNA以高濃度洗脫到最小體積的水或TE緩沖液中。

洗脫DNA非常適合用于PCR、DNA測序、DNA連接、核酸內(nèi)切酶消化、RNA轉(zhuǎn)錄、放射性標記、陣列等。

描述

DNA Clean&Concentrator-5是一種PCR純化試劑盒，可從PCR、核酸內(nèi)切酶消化、DNA修飾反應、同位素/熒光標記反應等中純化高達5µg的DNA。該產(chǎn)品有助于去除DNA聚合酶、修飾酶、RNA聚合酶、連接酶、激酶、核酸酶、磷酸酶、，和限制性內(nèi)切酶，以及游離dNTPs及其類似物，包括放射性標記和熒光衍生物。洗脫DNA適用于PCR、陣列、連接、測序等。

耐洗滌劑性≤5%Triton X-100，≤5%吐溫-20，≤5%沙可西，≤0.1%十二烷基*

洗脫體積≥ 6微升

設(shè)備微量離心機

純度A260/A280>1.8

來自PCR、核酸內(nèi)切酶消化、DNA修飾反應、同位素/熒光標記反應等的樣本源DNA。

大小范圍為50 bp至23 kb

產(chǎn)量≤ 可回收5微克總DNA。對于50bp至10kb的DNA，回收率為70-95%。對于11kb到23kb的DNA，回收率為50-70%。

問題1：有上限和無上限有什么區(qū)別？

區(qū)別是帽子。列之間的所有其他內(nèi)容（最大容量、列矩陣等）都是相同的。不確定使用哪一個？這主要取決于偏好。有些人喜歡有蓋的色譜柱，以便于標記或增加安全性，而另一些人喜歡無蓋色譜柱，以加快樣品處理。

問題2：DNA樣本的最小輸入量是多少？

使用低于50µl的體積可能會導致回收率降低。Zymo研究建議用水將起始體積提高到100µl，以確保最佳結(jié)合條件。

問題3：可以重新加載多少次列？

Zymo Research建議重新加載色譜柱不超過5次，因為綁定效率可能會降低。

問題4：如果柱上裝載的DNA超過規(guī)定的最大結(jié)合容量，會發(fā)生什么情況？

由于硅膠基質(zhì)堵塞，色譜柱過飽和可能導致DNA總損失。

問題5：如何處理儲存在DNA/RNA的裸DNA？

向樣品中加入等量的乙醇（95-100%），并充分混合。樣品已準備好結(jié)合，不需要DNA結(jié)合緩沖液。繼續(xù)執(zhí)行步驟2。

問題6：可以回收的DNA的下限和最小量是多少？

皮克級的DNA可以恢復。該限制基于檢測方法的靈敏度。

問題7：如果在開始之前沒有向DNA清洗緩沖液中添加乙醇，我該怎么辦？

在清洗步驟中，DNA將從柱上洗脫。使用適當量的DNA結(jié)合緩沖液重新綁定樣本，并使用適當制備的洗滌緩沖液清洗柱。