beyotime試劑盒使用前要做哪些準(zhǔn)備工作

更新時間：2025-12-07

點擊次數(shù)：118

　　beyotime試劑盒用于定量或定性檢測血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等樣本中的抗原、抗體、激素、細(xì)胞因子等生物分子。其原理基于抗原-抗體特異性結(jié)合與酶促顯色反應(yīng)，實現(xiàn)對目標(biāo)物的精準(zhǔn)檢測。然而，實驗結(jié)果易受操作細(xì)節(jié)、環(huán)境條件與試劑保存狀態(tài)影響。掌握beyotime試劑盒的科學(xué)使用方法，是確保輸出真實、可靠數(shù)據(jù)的關(guān)鍵。

　　一、使用前準(zhǔn)備

　　試劑檢查與平衡：

　　檢查試劑盒是否在有效期內(nèi)，包裝是否完好；

　　將試劑（尤其是酶標(biāo)抗體、顯色液、終止液）從2-8℃冰箱取出，室溫（18-25℃）平衡30-60分鐘，避免冷凝水影響反應(yīng)；

　　輕柔混勻液體試劑，避免劇烈震蕩產(chǎn)生氣泡。

　　樣本處理：

　　血清/血漿樣本需離心去除雜質(zhì)，避免溶血、脂血或細(xì)菌污染；

　　根據(jù)說明書要求進行稀釋，確保樣本濃度在檢測范圍內(nèi)。

　　儀器與耗材準(zhǔn)備：

　　準(zhǔn)備酶標(biāo)儀（檢測波長依顯色系統(tǒng)而定，如TMB為450nm）、洗板機或手動洗瓶、移液器（定期校準(zhǔn)）、一次性槍頭與酶標(biāo)板（若未預(yù)包被）。

　　二、加樣與孵育

　　加樣操作：

　　使用多通道移液器，確保加樣量準(zhǔn)確（通常50-100μL）；

　　避免交叉污染，更換槍頭，加樣針勿觸碰孔壁；

　　設(shè)立空白孔、標(biāo)準(zhǔn)品孔（梯度稀釋）、質(zhì)控孔與待測樣本孔。

　　孵育條件：

　　嚴(yán)格按照說明書控制孵育時間與溫度（通常37℃水浴或恒溫箱）；

　　覆蓋封板膜，防止蒸發(fā)與污染；

　　孵育期間避免頻繁開閉溫箱。

　　三、洗滌步驟

　　充分洗滌：

　　每步反應(yīng)后需洗滌3-5次，去除未結(jié)合物質(zhì)，降低背景噪音；

　　使用洗板機時，確保洗液充滿孔底，避免“花板”；

　　手工洗滌時拍干，但避免孔內(nèi)干涸。

　　洗滌液配制：

　　使用蒸餾水或去離子水配制PBST（含吐溫-20的磷酸鹽緩沖液），現(xiàn)配現(xiàn)用。

　　四、顯色與終止

　　顯色反應(yīng)：

　　加入顯色液（如TMB或OPD），避光孵育指定時間（通常10-30分鐘）；

　　觀察顏色變化，避免過度顯色導(dǎo)致信號飽和。

　　終止反應(yīng)：

　　準(zhǔn)確加入終止液（如2MH2SO2），立即終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色；

　　終止后輕輕震蕩混勻，確保顏色均勻。

　　五、讀數(shù)與數(shù)據(jù)分析

　　酶標(biāo)儀檢測：

　　在規(guī)定時間內(nèi)（通常30分鐘內(nèi)）讀取吸光度（OD值）；

　　設(shè)置正確的波長（主波長450nm，參考波長630nm）。

　　標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：

　　以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；

　　采用四參數(shù)擬合或線性回歸計算待測樣本濃度。

　　結(jié)果判讀：

　　檢查空白孔OD值是否達標(biāo)（通常<0.1）；

　　質(zhì)控品結(jié)果應(yīng)在允許范圍內(nèi)，否則實驗無效。

上一條英國St John's Laboratory生物公司STJE0005616產(chǎn)品介紹
下一條【新品速遞】Anogen公司CA19-9抗體和ELISA試劑盒介紹

草草地址线路①屁屁影院成人丨中文人妻熟女乱又乱精品丨成人婷婷网色偷偷亚洲男人的天堂丨中文字幕美人妻亅u乚一596丨青草伊人久久综在合线亚洲观看

beyotime試劑盒使用前要做哪些準(zhǔn)備工作