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Haematologic HCIX-0040說明書

發布時間:2018/10/15點擊次數:440

Haematologic HCIX-0040說明書

HTI HCIX-0040

 

Haematologic Technologies,Inc。(HTI)是一家ISO 9001:2015注冊公司,是一家專業從事體外研究用高質量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點是凝血級聯中涉及的蛋白質,以及骨代謝的調節。HTI產品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質,包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務包括定制蛋白質純化,蛋白質修飾,化驗開發,合同制造和合同研究。

 

Haematologic HCIX-0040說明書

 

Coagulation Factor IX

凝血因子IX

 

 

  •  

HCIX-0040 人因IX

 

  •  

尺寸

100微克

公式

50%甘油/水(v / v)

  •  

存儲

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

  •  

活動決定

凝血試驗

保質期(妥善保存)

12個月

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 BCIX-1040 牛因子IX 

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尺寸

100微克

公式

50%甘油/水(v / v)

  •  

存儲

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

  •  

活動決定

凝血試驗

保質期(妥善保存)

12個月

  •  

 

酶原因子IX是單鏈維生素K依賴性糖蛋白,其在肝臟中合成(1-3)。因子IX的結構域結構類似于其他維生素K依賴性凝血因子的結構域結構。NH 2 - 末端區域含有12個γ-羧基谷氨酸(gla)殘基,其促進因子IX與帶負電荷的磷脂表面的鈣依賴性結合。與表皮生長因子(EGF)同源的兩個結構域跨越NH2-末端gla結構域和活化肽(Ala-146至Arg-180)之間的區域。

因子IX由因子XIa或因子VIIa /組織因子/磷脂復合物激活。位點A處的切割(參見圖)產生中間體IXa,其隨后通過在位點B處的切割而轉化為*活性形式IXaβ.NH2-末端輕鏈(GLA和EGF結構域)保持共價連接至COOH-末端重鏈。通過二硫鍵。絲氨酸蛋白酶催化三聯體(Ser-365,His 221,Asp-269)位于重鏈中。因子IXaβ是“內因子Xase復合物”(因子VIIIa / IXa / Ca2 + /磷脂)的催化組分,其將因子X蛋白水解活化為因子Xa。

通過常規方法(4)和免疫親和層析(5)的組合從新鮮冷凍血漿制備人因子IX。通過Fujikawa等人描述的方法的改進,從新鮮的檸檬酸化牛血漿制備牛因子IX。(6)。純化的蛋白質以50%(vol / vol)甘油/ H2O提供,應儲存在-20oC。通過SDS-PAGE分析確定純度,并使用因子IX凝固測定法測量活性。

 

凝膠

Novex 4-12%Bis-Tris

加載

人因子IX,每泳道1μg

緩沖

MOPS

標準

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

 

本土化

等離子體

血漿濃度

4-5ug / ml(人)(1)

行動方式

酶原; 絲氨酸蛋白酶因子IXa的前體

分子量

55,000(人類)(8)
55,400(牛)(6)

消光系數

Ë

1%

1厘米,280納米

 

= 13.2(人類)(7)

 

 

= 12.0(牛)(6)

 

等電點

4.2-4.5(人類)(7)
3.7(牛)(6)

結構體

單鏈,NH2-末端gla-結構域,兩個EGF結構域

碳水化合物百分比

17%(人類)(7)
26%(牛)(6)

翻譯后修改

一個β-羥基天冬氨酸(9),十二個玻璃殘留物(7)

 

 

  1. Thompson,AR,Blood,67,565(1986)。
  2. Hedner,U。,et al。,In Hemostasis and Thrombosis,2nd edition,ed。RW Colman,J。Hirsh,VJ Marder,EW
  3. 薩爾茲曼,第39-47頁。JP Lippincott Co,費城,1987年。
  4. Fujikawa,K.,Davie,EW。,Methods in Enzymology,45,74(1976)。
  5. Bajaj,SP,et al。,Prep。Biochem。,11,397(1981)。
  6. Jenny,RJ,et al。,Prep。Biochem。,16,227(1986)。
  7. Fujikawa,K。等,Biochemistry,12,4938(1973)。
  8. Discipio,RG等,Biochemistry,16,698(1977)。
  9. Osterud,B.,et al。,J.Biol。Chem。,253,5946(1978)。
  10. McMullen,BA,et al。,BBRC,115,8(1983)。

 

 

 

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