NittoPhase®HL固相載體使用指南

NittoPhase®HL Solid Support是一種優(yōu)化設(shè)計的支持藥物級寡核苷酸高效合成的支持物。交聯(lián)聚苯乙烯樹脂具有高產(chǎn)率獲得高質(zhì)量寡核苷酸所需的幾種*性能，超過了市場上可用的各種其他支持的性能。已證明該支持可在小規(guī)模和大規(guī)模合成以及各種合成儀（包括OligoProcess™）中有效執(zhí)行。

層析柱填充建議

(a) 固定床柱

注意：為避免合成儀的潛在機械問題，使用NittoPhase®HL干粉填充合成柱，僅使用規(guī)定體積的推薦量。

1. 選擇具有所需裝載物的NittoPhase®HL Solid Support。

2. 數(shù)量  of  NittoPhase®HLSolid  支持  在6.3 mL色譜柱中有效合成所需的量見下表。*

3. 使用下表中推薦用于合成的載體量，用干燥載體填充不銹鋼色譜柱，連接色譜柱并啟動合成程序。

*對于其他尺寸的色譜柱，所需的裝量與上文所列體積相比呈線性變化。色譜柱填充體積可能因寡核苷酸的長度和修飾而異。

(b) 可調(diào)列

1. 確定合成的規(guī)模。

2. 根據(jù)支承載荷計算所需NittoPhase®HL固相支承的量：

支撐物用量[g]= 規(guī)模[µmol]÷支撐物上樣量[µmol/g]

3. 使用以下公式計算柱體積(CV)：

CV[mL]= 支持量[g]÷0.109**

4. 使用以下公式計算柱高h：

h[cm]= 4 CV[mL]÷πd2 d為色譜柱直徑(cm)

5. 將支架轉(zhuǎn)移至色譜柱中，將活塞牢固調(diào)整至高度h。

6. 開始合成。

(c) 合成操作

1. 標準合成程序?qū)⑦m用于NittoPhase®HL Solid Support。

2. 合成完成后，使用標準去保護程序。用乙醇/水(1:1，v/v)沖洗載體以*回收。

3. 對于UnyLinker NittoPhase®HL，在55 ℃濃縮氫氧化銨中脫保護9-11小時足以進行UnyLinker裂解。

**基于250µmol/g的21聚體RNA。色譜柱填充量可能因寡核苷酸的長度和修飾而異。